上海索寶梯度PCR儀應(yīng)用原理等介紹
更新時(shí)間：2024-06-28 | 點(diǎn)擊率：1534
上海索寶梯度PCR儀的原理基于PCR反應(yīng)的溫度敏感性。 PCR反應(yīng)是一種體外擴(kuò)增DNA的技術(shù)，通過(guò)不斷重復(fù)三個(gè)步驟(變性、退火和延伸)，可以在短時(shí)間內(nèi)擴(kuò)增目標(biāo)DNA序列。 而PCR反應(yīng)的成功與否，很大程度上取決于反應(yīng)體系中的溫度。 梯度PCR儀通過(guò)在反應(yīng)管中創(chuàng)建溫度梯度，使得不同溫度下的反應(yīng)條件同時(shí)存在。
一次性PCR擴(kuò)增可以設(shè)置一系列不同的退火溫度條件(通常12種溫度梯度)的稱(chēng)之為梯度PCR儀。 因?yàn)楸粩U(kuò)增的不同的DNA片段其適合的退火溫度不同，通過(guò)設(shè)置一系列的梯度退火溫度進(jìn)行擴(kuò)增，從而一次性PCR擴(kuò)增就可以篩選出表達(dá)量高的適合退火溫度進(jìn)行有效的擴(kuò)增。
由于傳統(tǒng)的普通PCR儀一次只能運(yùn)行一個(gè)特定的退火溫度，因此如果要設(shè)置不同的退火溫度，那么就需要多次運(yùn)行才能夠?qū)崿F(xiàn)，這一過(guò)程需要花費(fèi)大量的時(shí)間。 而梯度PCR儀以此就可以實(shí)現(xiàn)多個(gè)不同的退火溫度，這樣可以節(jié)約時(shí)間，在效率的提升方面就非常明顯了，這樣既節(jié)約時(shí)間，也節(jié)約成本。 因此從功能和特性上來(lái)說(shuō)，梯度PCR儀的性能是要優(yōu)于普通PCR儀，而且在不設(shè)置梯度的情況下梯度PCR儀也可當(dāng)做普通的PCR用，非常方便。
可以把一次PCR擴(kuò)增實(shí)驗(yàn)設(shè)置成一系列不同的退火溫度條件(溫度梯度)的實(shí)驗(yàn)，這樣的儀器就叫梯度PCR儀。 設(shè)置梯度的主要原因是因?yàn)楸粩U(kuò)增的不同DNA片段，其最適退火溫度不同，通過(guò)設(shè)置一系列的梯度退火溫度進(jìn)行擴(kuò)增，從而一次性PCR反應(yīng)就可以篩選出表達(dá)量最高的最適退火溫度，優(yōu)化實(shí)驗(yàn)，進(jìn)行有效的擴(kuò)增。 梯度PCR儀主要用于研究未知DNA退火溫度的擴(kuò)增，在節(jié)約成本的同時(shí)也節(jié)約了時(shí)間。
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